噬菌体扩增结合环介导等温扩增 （PA-LAMP） 用于快速检测生禽肉中的活肠炎沙门氏菌
发布时间：2025-05-07 浏览次数：13 分享：
沙门氏菌属是全球主要的食源性病原体之一。该属由2600多种不同的血清型组成，即鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌，它们主要导致人类沙门氏菌病病例。
沙门氏菌可以存在于多种食物中，但鸡蛋和肉类等家禽产品是食物链中的主要来源。
鸡肉的生产具有战略意义，因为它是最经济的肉类之一，也是全球消费量最大的肉类之一。欧盟在2022年生产了 980 万吨鸡肉，并从巴西、泰国和乌克兰进口了高价值家禽产品，包括胸肉和家禽制品。欧盟在第1086/2011号法规 （EC）确定了25克新鲜禽肉中不含鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的标准。
因此，及时检测沙门氏菌十分重要。
现有的基于 DNA 的技术检测方法的一个典型局限性是它们无法区分活的微生物和非活的微生物。然而噬菌体可以专门感染和复制活细菌细胞，噬菌体仅在存在目标细菌时繁殖，而不是检测细菌本身，因此基于噬菌体的检测可以仅仅检测活菌。
此外，单个噬菌体感染每个细菌细胞会产生数十到数百个新的病毒颗粒，从而提高了相同范围内该方法的检测限。
在本研究中，作者利用沙门氏菌噬菌体vB_SenS_PVP-SE2 (PVP-SE2) 结合LAMP扩增开发了一种新的肠炎沙门氏菌检测方法，噬菌体PVP-SE2的潜伏期为 15分钟，上升期为15分钟，每个感染细胞平均有240个后代噬菌体，能够缩短检测沙门氏菌所需的富集期。因此，该方法允许在同一天 （8 h） 检测活细胞。并将该方法在加标鸡胸肉样品中进行了评估。
图 1 荧光可视化图片
结论：该研究成功开发了用于检测鸡胸肉中活肠炎沙门氏菌的PA-LAMP 测定法。在大约8小时内，包括样品预富集、DNA 提取和LAMP，可以检测到 1.1 CFU/25 g 的食品样品。这使得该方法适用于当天检测。此外，荧光可视化方法的开发允许该方法应用于现场检测。总而言之，本研究开发了一种新的、快速的、简单的、非技术要求高且经济的方法，可以在同一个工作日内检测出活肠炎沙门氏菌，其结果与参考方法（ISO 6579）相当。
参考来源：Lamas A, Santos SB, Prado M, Garrido-Maestu A. Phage amplification coupled with loop-mediated isothermal amplification (PA-LAMP) for same-day detection of viable Salmonella Enteritidis in raw poultry meat. Food Microbiol. 2023 Oct;115:104341. doi: 10.1016/j.fm.2023.104341. Epub 2023 Jul 11. PMID: 37567642.
来源：微生物安全与健康网，作者~翟慧潺。
